LABORATORY SAFETY


Safety is vitally important for the laboratory. It is imperative that the entire laboratory staff understands the importance of safety training and the proper implementation of safety policies and procedures. By following a few simple precautions, potentially dangerous accidents can be prevented.

Maintain training records demonstrating that all laboratory staff have been trained in safety procedures, including infectious waste disposal, fire safety, electrical hazards, and general personal and technical safety procedures.

SAFETY OF PATIENTS

Patients should be prohibited form entering laboratory areas of the laboratory.

STANDARD PRECAUTIONS FOR SPECIMEN HANDLING

Use barrier protection to prevent skin and mucous membrane contamination while handling the following human body fluids.

Blood
Semen and vaginal secretions
Tissues, cerebral spinal fluid, synovial, pleural, peritoneal, pericardial, amniotic)

Standard precautions are not mandated for handling urine, feces, nasal secretions, sputum, saliva, sweat, tears, or vomitus unless the specimen is bloody. However, a laboratorian should consider all body fluids to be a source of infection and take appropriate precautions when handling them.

GENERAL LABORATORY SAFETY

- Handwashing is the single most important safety practice in the laboratory.
Wash hands:

After removing gloves or other personal protective equipment.
Before touching your eyes or mouth.
Immediately, if a specimen or reagent has been spilled on your bare hands.
Before eating, drinking, or smoking.

- Wear gloves whenever you:

Handle blood, body fluids, mucous membranes, or open wounds.
Touch items or surfaces soiled with blood or body fluids, including dried blood and body fluids.
Perform venipuncture, fingersticks, and other vascular access procedures.
Have cuts, scratches, dermatitis, or other breaks in your skin.
Universal Precaution: No gloves should be re-used. Replace when damaged.

- Wear protective clothing and equipment while performing laboratory procedures involving potentially infectious materials. Remove protective clothing and equipment before leaving the laboratory.

- Every laboratory should have easy access to an eyewash. The device should contain or accommodate enough water to flush the eyes and facial area continuously for 15 to 30 minutes.

- DO NOT recap, bend, or break needles after drawing blood. If it is necessary to recap, a one-handed, passive technique should be used.

- Do not eat, drink, smoke, handle contact lenses, or apply cosmetics or lip balm in the laboratory.

- Employers must offer the Hepatitis B vaccine series (free of charge) to any employee that is exposed on the job to the potentially infectious materials listed above. Employees who choose not to receive the Hepatitis B vaccination must sign a declination form.

- Use laboratory refrigerators ONLY for storage of reagents, controls, or specimens. No food or drink is allowed in laboratory refrigerators.

- Disinfect laboratory countertops daily. A 10% solution of household bleach and water (1 part bleach plus 9 parts water) is an effective disinfectant with both bacterial and viral organisms. Work areas should be wiped and allowed to soak. To retain potency and effectiveness, the 10% solution must be prepared daily. Wear utility gloves when cleaning.

- Clean spills up immediately. Spills that involve blood, urine, and reagents can be cleaned up with paper towels and by applying a 10% bleach solution to most spill sites. Gloves must be worn and other tools must be used to prevent personal and environmental contamination and cuts.

- Whenever possible, use disposable plastics rather than glass. Broken glass gives rise to “sharps” that may need to be handled in the same manner as needles.

- Pipette reagents with a mechanical pipette or a bulb. NEVER PIPETTE BY MOUTH!

- Never open a running centrifuge or slow it down using your hands, a pencil, or similar device. Disinfect all centrifuges regularly, following manufacturer’s instructions. Disinfect the centrifuge immediately after a spill. Centrifuges must be covered when in use (i.e., centrifuges must have a lid). Always balance specimens in the centrifuge.

- When operating a centrifuge, ensure proper balance is maintained. Imbalance of the rotor causes vibration, which increases wear on the centrifuge, and causes tubes to break more frequently.

- Inspect all tubes before centrifugation. Do not use cracked or scratched tubes.

- Pick up broken glass using a hemostat or other device, wearing puncture-resistant gloves. Do not simply use gloved hands to pick up potentially contaminated sharps. If a tube breaks inside the centrifuge, use forceps to remove any broken glass and clean the interior with a 1:10 dilution of chlorine bleach. Allow to stand for 5 minutes then rinse with water and dry.

- Clearly label all reagents and other materials. If caustic or volatile materials are used, store only minimal quantities on the premises. Establish a clean-up procedure to be followed in case of a spill or broken container. Sand or other absorbent material may be used to clean up chemical spills. Refer to the Material Safety Data Sheets in your laboratory's Hazardous Chemical Control Manual and train employees in their proper use.

INFECTIOUS WASTE HANDLING AND DISPOSAL

-Decontaminate infectious waste before disposal.

-Infectious waste (biohazard) containers, sharps and biohazard bags, should be conveniently located and of sufficient volume to accommodate the infectious waste generated by the laboratory. They must be labeled or color-coded in red to warn of biohazardous material.

-Biohazard containers should be handled with gloved hands.

-Microbiological cultures should not be discarded in sanitary sewers.

ELECTRICAL EQUIPMENT

-Have an adequate number of grounded electrical outlets and enough lighting for safe laboratory operations. Be familiar with the location of circuit breakers for your laboratory. Electrical equipment must have safe cords and three prong grounded plugs.

-Maintain equipment properly to avoid electrical hazards. IF an electrical problem with a piece of equipment is suspected, immediately turn the equipment off, disconnect it from the outlet, and have it repaired.

FIRE SAFETY

-Mount a small, multi-use (ABC) fire extinguisher on the laboratory wall. The fire extinguisher should be tested and maintained by your Facilities officer, and all laboratory staff should know how to use it.

-Clearly mark exits from the building. All office personnel should know how to leave the building quickly in case of fire.

IN CASE OF ACCIDENT

-Notify the your officer as soon as possible after the incident. If an accident involves exposure to potentially infectious materials (e.g., a needle stick).

-Specific policies should be developed by each laboratory for the following items:

A list of the names and telephone numbers of persons incharge at the lab to contact in an emergency.
Procedures for cleanup of reagent and specimen spills (see your Hazardous Chemical Control Plan)
An accident log where the person’s name, type of accident, and the date are included.
Office evacuation plan.

Berbagi Pengalaman Kisah Nyata: Imunisasi


[Judul asli: SHARING PENGALAMAN/KISAH NYATA]

Sungguh, Allah Maha Besar yang telah membukakan rahasia dari IMUNISASI selama ini.
AKHIRNYA TERUNGKAP! ternyata imunisasi sangat berbahaya! LINDUNGI putra-putri anda dari IMUNISASI sebelum hal-hal mengerikan terjadi...
MENGUAK RAHASIA yang terpendam lama..
INFORMASI PENTING INI, siap memberikan warna baru dalamhidup anda. Segala hal mengenai Niat-niat terselubung pembuat VAKSIN dan BAHAYA IMUNISASI ada disini...bagi teman2 yang membutuhkan data dan fakta nyata akan bahaya imunisasi ini-silahkan hubungi saya di
bangdinyani@yahoo.com
Alamat e-mail ini diproteksi dari spabot, silahkan aktifkan Javascript untuk melihatnya
SEGERA akan saya kirimkan sekitar 80 halaman FAKTA NYATA tentang BAHAYA IMUNISASI !
Salam Hormat
Ibu Suryani

Subject: SHARING PENGALAMAN/KISAH NYA
Ini kisah nyata yang saya alami, sebagai informasi / pelajaran bagi Rekan-rekan jika suatu saat ada yang menghadapi cobaan seperti yang saya alami.
Pada pertengahan bulan Juni 2005, Istri saya melahirkan dengan baik (walau dengan operasi caesar), bayi kami sehat tidak kurang suatu apapun, beratnya 3.150 Kg dengan panjang 49 Cm. Sekali lagi Kami sangat bahagia atas peristiwa ini. Kembali Segala saran-saran dokter (Dokter Anak: Prof. "R" di RS "A") kami laksanakan dengan baik, minum vitamin-vitamin, susu ibu menyusui, menjaga kesehatan makanan/perlengkapan makan, makan makanan bergizi, menjaga pantangan-pantangan dalam merawat bayi. Dan rutin melakukan ImunisasDisinilah mulai timbul bencana pada keluarga kami, pada saat anak/bayi kami berusia +/- 7 bulan, untuk kesekian kalinya kami datang untuk imunisasi, pada saat itu kami datang ke dr Anak kami Prof. "R" di RS "A" , namun pada saat itu beliau tidak masuk, diganti oleh dokter pengganti/wanita yang masih muda/mungkin dokter baru (namun saya lupa namanya). Begitu melihat jadwal pada buku RS anak saya, dokter tersebut langsung siap melakukan imunisasi terhadap anak saya, "hari ini imunisasi HIB ya ?!", saya & istri tahu bahwa imunisasi HIB tersebut salah satunya untuk mencegah radang Otak, makanya Istri saya sempat bertanya, "dok, seandainya imunisasi ini tidak dilakukan bagaimana ya ?!", lalu dokter pengganti tersebut menjawab dengan nada agak ketus, "apakah ibu mau, anak ibu jadi Idiot?! (sambil memperagakan tampang muka orang yang idiot dengan lidah dijulurkan keluar)". Karena begitu sayangnya kami dengan anak kami, sudah barang tentu kami tidak mau anakkami idiot, lagi pula saya saat itu berfikir demi kesehatan anak kami tentulah kami menuruti apa kata dokter yang lebih tahu/berpengalaman dengan imunisasi tersebut. Lalu tanpa memeriksa dengan seksama kondisi anak kami dalam keadaan fit/tidak, dan perlu tidaknya imunisasi tersebut kembali diberikan kepada anak saya (karena sebelumnya pada saat berumur +/- 5 bulan anak kami telah pernah diberikan imunisasi HIB I) dokter pengganti tersebut langsung memberikan suntikan imunisasi HIB II kepada anak saya.
Dua hari setelah pemberian imunisasi HIB yang kedua tersebut anak kami mengalami panas, lalu turun, panas lagi lalu turun ( 2 atau 3 hari sekali pasti mengalami panas ) dan anehnya panasnya hanya dikepala dan di pundak/leher serta di ketiak saja, badan/tangan dan kakinya tidak. Hal ini berlangsung +/- selama dua minggu, jika sedang panas, panasnya pernah sampai 40,6 derajat C.
Sewaktu di kantor saya sempat bertanya kepada rekan-rekan yang masih/pernah punya anak kecil mengenai panas anak saya, banyak diantara mereka yang bilang panas setinggi itu berbahaya, malah sebagian teman bilang anaknya panas "cuma" 38 derajat C saja sudah Step/kejang-kejang, namun sampai hari itu anak saya belum pernah Step/kejang-kejang, padahal panasnya beberapa kali sampai 40 derajat C, dan biasanya akan turun dengan sendirinya, paling-paling hanya rewel, susah tidur. Saya mulai Panik dan khawatir, takut jika anak saya tiba-tiba kejang/step di rumah.
Dan Saya mulai ke dokter, kebetulan di dekat rumah ada dokter Umum di RS. "D" (Berhubung waktu itu hari minggu tidak ada dokter Spesialis anak yang Buka). Dokter tersebut memberikan beberapa macam obat, ada yang syrup, ada yang serbuk. Setelah memakan obat-obatan tersebut selama 3 hari, anak kami masih belum membaik (panasnya masih naik turun), lalu kami ke RS "A" tempat dokter anak saya Prof. "R" dimana selain diberi obat-obatn juga disarankan untuk memeriksakan darah anak saya ke Lab. (waktu itu saya langsung periksakan anak saya ke Lab. "P" yang sudah berpengalaman), Karena setelah kami ketahui hasilnya "negatif/tidak ada penyakit" dan obat dari Prof. "R" di RS "A" juga belum efektif menyembuhkan panas anak saya, akhirnya saya membawa anak saya ke RS "B" Cikini (karena saya tahu di RS "B" ada ruang perawatan anak, jika memang anak saya perlu di rawat).
Di sinilah ketabahan/kesabaran kami di uji. Saya datang pertama kali keRS "B" cikini, Kamis 17 Maret 2005 pagi +/- jam 7.00 Wib, dan setelah bertanya kesana-kemari saya langsung membawa anak saya ke UGD (Unit Gawat Darurat) karena masih pagi, dan disana ada dokter jaga, setelah dilakukan beberapa tindakan lalu +/- jam 08.30 saya bawa anak saya ke dokter Spesialis anak dr. "N", baru kemudian diminta untuk di bawa ke ruang perawatan untuk di rawat.
Pintarnya RS, setiap mereka akan melakukan tindakan medis terhadap anak kami, kami/orang tua harus menyetujui terlebih dahulu tindakan tersebut, dengan catatan apabila orang tua pasien tidak menyetujui suatu tindakan medis, kami juga disodorkan surat penolakan tindakan medis, yang didalamnya tertera apabila terjadi apa-apa terhadap anak saya, maka pihak RS tidak bertanggung jawab karena tindakan medis yang akan mereka lakukan tidak disetujui. Itu artinya kami/pasien bagai memakan buah simalakama, dan tentunya harus mengikuti semua langkah-langkah medis yang dilakukan oleh pihak RS, karena memang tidak ada pilihan lain.
Anak saya langsung di infus dan diambil darahnya untuk pengecekan (karena hasil cek darah yang saya bawa dari Lab "P" sebelumnya menurut pihak RS bisa berubah) walaupun akhirnya hasilnya juga masih "negatif" tidak diketahui penyebab/penyakit panas anak saya. Kemudian atas anjuran dokter anak saya harus puasa dari jam 15.00 (tiga sore) sampai dengan 21.00 (sembilan malam) kerena akan diambil darahnya lagi untuk pemeriksaan. Selama waktu tersebut kami sedih melihat anak saya, walaupun ada infus di kakinya, namun anak saya tampak ingin makan/minum, namun kami tidak berikan walau mulutnya seperti orang yang kehausan. Kami sangat mengkhawatirkan fisik anak saya.
Benar saja apa yang Saya dan Istri saya khawatirkan terjadi, esokan hari/Jum'at subuh begitu panas anak saya kembali tinggi sampai lebih dari 40 derajat C, anak saya langsung kejang/Step (padahal sewaktu di rumah belum pernah sekalipun anak saya kejang/Step seperti saat itu), suster-suster RS mulai memberikan anak saya Oksigen melalui selang ke hidung, dan karena panas/Kejangnya lebih dari 1/2 jam, maka anak saya pagi itu juga langsung di bawa ke ruang ICU/PICU (Pedriatic Intensive Care Unit). Anak saya di diagnosa awal "kemungkinan" terkena Radang Otak yang disebabkan oleh Virus/bakteri, sehingga mengganggu fungsi pengaturan suhu tubuh. Dan dokter bilang kemungkinan sembuhnya hampir tidak ada, kalaupun sembuh akan ada efek sisa, misalnya jadi Idiot, Lumpuh, dsb. (Pihak RS langsung Pesimistis untuk penyembuhan anak saya).
Di ICU anak saya di rawat oleh Tim Dokter, dengan ketua Timnya yaitu dr. "Y" (dokter spesialis anak senior RS "B"), dengan anggota beberapa dokter Spesialis THT, Syaraf, Urologi, Bedah, dsb. Ditambah dengan dr.Konsulen/semacam penasihat, yaitu Prof. "A" dari RS "C", selain dokter tim tersebut dibantu oleh beberapa orang suster yang dalam seharibekerjanya dibagi menjadi 3 shift, suster-suster inilah yang memonitor perkembangan kesehatan anak kami tiap saat. Suster juga sama seperti karyawan di kantor kita, ada yang teliti, ada yang rajin, ada yang baru/belum berpengalaman, ada yang text book, ada yang kurang berani bertindak, dsb.
gambar: efrizalwordpress.com
Sabtu subuh (hari ke dua perawatan) anak saya kembali panas tinggi dan kembali kejang, kali ini suster jaga pada saat itu terlihat kurang tanggap/cekatan dalam memberi tindakan terhadap anak saya, malahan pada saat kejang, karena tenaga medis tidak begitu "care", Istri saya sendiri yang harus mengganjal mulut anak saya dengan alat pengganjal agar lidahnya tidak tergigit, dan karena terlalu lama tidak ditangani dengan baik akibatnya anak saya semakin lemah, terlihat pada mesin yang memonitor Oksigen dan Jantung anak saya saturasinya (istilah mesin tsb) terus menurun. Pada saat tim Dokter datang kondisi anak saya sudah memburuk, bahkan pada layar monitor mesin saturasi sempat terlihat "Flat", artinya paru-paru/oksigen dan jantung anak saya telah berhenti bergerak. Saya dan Istri langsung Shock dan lemas tangis pun tak terbendung. Beberapa tenaga medis terus berusaha memompa secara manual nafas anak saya, lalu mereka segera memasang mesin Ventilator/alat bantu pernafasan (mesin yang sama dengan yang digunakan Almh. Sukma Ayu) dan menyalakannya. Seperti biasa pihak RS menyodorkan surat persetujuan tindakan pemasangan mesin tsb. Pada saat itu saya & istri sangat Shock, sehingga konsentrasi kami hanya kepada anak kami tersebut, oleh karena saya tidak begitu memperdulikan surat persetujuan melakukan tindakan yang disodorkan RS, akibatnya pihak RS langsung mencopot kembali selang-selang yang terpasang dan mematikan mesin/listrik Ventilator tsb. Kami kesal dan marah (walau hanya di dalam hati), lalu segera meraih surat persetujuan tindakan tsb dan menandatanganinya, barulah alat tersebut kembali dipasang/dinyalakan, dan selamatlah nyawa anak saya ketika itu (padahal menurut hemat saya hitungannya hanya detik untuk mengambil keputusan tersebut/terlambat sedikit mungkin akan berbeda ceritanya).
Kurang lebih dua minggu alat Ventilator itu terpasang, dan dua minggu itu pula kami mengalami pengalaman yang sangat pahit dalam kehidupan kami, kami menyaksikan betapa tersiksanya anak yang kami sayangi yang terus menerus dilakukan tindakan medis, diantaranya :
1. Diambil darahnya yang hampir setiap hari (dengan cara disedot dengan alat suntik), walaupun hasil Lab.-nya selalu negatif dengan jumlah pengambilan dalam sehari bisa 3X, dan dalam sekali ambil antara 5 - 10 CC darah, padahal kondisi anak saya ketika itu sangat lemah/terlihat kuning seperti kurang darah. Diambil sampel Urine, sampel cairan dari perut, Bahkan sampai diambil contoh cairan otaknya (melalui penyedotan pada ruas tulang belakang) walaupun hasilnya juga negatif.
2. Berganti-ganti tempat untuk memasukan jarum Infus, dari vena-vena di kepala, tangan, kaki, selangkangan, malah karena Tim medis sudah kesulitan memasukan jarum infus, tim medis melakukan tindakan Vena Sectio (operasi kecil/merobek kulit/daging terluar) untuk dicari pembuluh vena yang berada agak ke dalam agar jarum infus dapat memasukan cairan infus ke tubuh anak saya. Kedua pergelangan tangan dan kaki anak saya telah di-Vena Sectio.
3. Bius Total, dengan alasan takut mesin Ventilator tidak berfungsi dengan baik apabila anak saya dalam keadaan sadar.
4. Diberi obat-obatan/anti biotik berganti-ganti sesuai indikasi/kemungkinan (Baru kemungkinan/seperti coba-coba) penyakitnya yang kadarnya tergolong keras, yang sudah pasti banyak efek sampingnya.
5. Karena sudah tidak ada tempat untuk Infus dan pengambilan darah (semua titik venanya telah habis), beberapa kali tindakan infus/pengambilan darah tidak berhasil dilakukan, lalu dicoba lagi dan di coba lagi sehingga menimbulkan bekas luka lebam/biru/bekas-bekas jarum suntik yang sangat banyak.
6. Dilakukan foto Thorax (Rongent) beberapa kali, Padahal sekali saja dilakukan di yakini dapat membunuh banyak sel tubuh)
7. Timbul efek samping, Paru-paru anak saya meradang/infeksi sehingga di penuhi banyak cairan, dan kepala belakang dan samping kiri memar/luka/lecet/bengkak. Karena terlalu lama dalam posisi tidur/di bius (hal ini seharusnya tidak perlu terjadi kalau tim medis sering merubah posisi tidur anak saya/setelah kami Complain baru hal ini dilakukan).
8. Masalah Biaya. Sering kali pihak RS (dokter/suster), menanyakan masalah biaya, walaupun berkali-kali saya katakan ada surat jaminan pembayaran dari Kantor. (Coba bayangkan seandainya memang kami tidak punya biaya).
9. Diagnosa penyakit yang tidak didukung bukti yang pasti, tim Medis hanya selalu mengatakan "Kemungkinan". Dari +/- satu bulan di rawat, anak saya sudah beberapa kali dikatakan kemungkinan penyakitnya bersumber dari Radang Otak karena penyakit/Virus/bakteri: Herpes, berubah Toxoplasma, berubah Maningitis, berubah Ensevalitis, sampaikesimpulan terakhir/dari sampel darah terakhir anak saya masih belum mengetahui pasti penyebab penyakitnya (bukti lab. adanya virus/bakteri tersebut tidak pernah ada).
Pada masa itu juga kami sempat beberapa kali bersitegang dengan beberapa Tim Medis anak saya, namun kami selalu kalah (mengalah) karena posisi kami sangat lemah, Ketua tim dokternya "dr.Y" sempat berujar bahwa mereka dokter-dokter ahli, " kalau di RS "C" bapak boleh bilang "begitu", karena banyak dokter muda yang sedang belajar disana" (maksudnya menanggapi guman saya dengan istri saya, "kok anak kita seperti kelinci percobaan ya!? dan kata-kata tersebut didengar Suster, yang lalu melaporkannya ke ketua Timdokternya), bahkan dokter itu juga sempat berkata "kalau bapak tidak puas, silahkan angkat anak bapak sekarang !!". Padahal saat itu, hal tersebut tidak mungkin kami lakukan karena seluruh tubuh anak saya terpasang mesin (Ada mesin ventilator, ada mesin saturasi Oksigen/Jantung, ada infus, ada selang Sonde/makanan, dsb)
Pernah seorang anggota Tim dokter yang didatangkan dari RS "C", yaitu dr. "I" ahli syaraf, setelah memeriksa anak saya mengatakan, "Penyakitnya malah dari RS ini semua, ya !!", Setelah masa perawatan 2 minggu tersebut timbul berbagai komplikasi; mata anak saya buta/tidak bisa melihat (menurutnya mungkin bisa sembuh karena anak saya masih bayi), Infeksi paru, memar di kepala, badan kaku/keras, padahal pertama kali masuk RS anak saya "hanya" sakit Panas. Kemudian dr "I" juga bilang " tadi saya coba lepas alat Ventilatornya agak lama, anak bapak bagus kok, dia sudah bisa bernafas sendiri ". Saya bersyukur berarti ada kemajuan pikir saya ketika itu.
Awal minggu ke tiga beberapa orang tim medis (ada beberapa dokter dan beberapa suster), mencoba melepas alat bantu nafas/Ventilator (mungkin setelah diberi masukan oleh dr. "I" dari RS "C"), di coba 1 jam, 2 jam, 3 jam dan seterusnya .... rupanya anak saya sudah bisa kembali bernafas sendiri/normal. Namun karena Sumber penyakitnya belum diketahui maka Tim medis beberapa kali melakukan penggantian Obat/anti biotik, diantaranya Acyclovir, Delantin, Tegatrol, TieNam, Meronem (dua jenis yang tertulis dibelakang katanya merupakan anti Biotik yang paling Ampuh/Mahal/Impor dari Amerika).
Minggu ketiga dan selanjutnya Panas kepala anak saya relatif stabil (antara 36 - 38 derajat C), dan kondisinya relatif membaik "hanya" tinggal matanya yang Buta dan badannya yang kaku (sendi-sendinya tidak bisa ditekuk), namun pengambilan darah masih dilakukan secara berkala, dan hampir setiap hari dilakukan Terapi Fisioteraphy (Penyinaran dan pemijatan). Sehingga akhir minggu ke tiga semua Infus telah dicopot, oksigen dicopot, hanya tinggal selang Sonde (Selang makanan/di mulut) yang masih terpasang.
Saya dan Istri (serta keluarga besar kami), terus berdoa setiap hari untuk kesehatan anak kami satu-satunya, sampai pada pertengahan minggu ke empat, dr. "I" (Specialis syaraf dari RS "C") bilang anak kami boleh di bawa pulang, namun minimal harus sehari masuk ke ruang perawatan biasa dahulu (sesuai prosedur RS "B"). Dan menurut dokter "I" juga, anak kami hanya cukup rawat jalan ke RS "C", untuk berobat ke dr. "I" dan dr. "L" (specialis tumbuh kembang/penyembuhan tubuh anak saya yang masih kaku-kaku). Setelah sehari berada di ruang perawatan biasa, dan tidakada masalah kami membawa anak kami pulang dengan membawa dua macam obat (Anti kejang dan anti Virus), dan sebelum pulang, lagi-lagi anak kami diambil kembali darahnya oleh RS untuk pemeriksaan penyebab penyakit anak kami, setelah itu barulah kami diperbolehkan pulang.
Namun tidak sampai 2 hari anak kami di Rumah, kami/keluarga lupa akan luka dibelakang kepalanya (akibat perawatan yang lalai sebelumnya) yang masih belum sembuh total, lukanya terlihat memar/merah/agak bengkak/dan mungkin infeksi, yang mungkin juga membuat anak kami panas lagi/karena infeksinya, Panasnya kembali naik sampai 40 derajat C lebih, bahkan ketika akan kami beri obat (yang kami bawa dari RS), anak kami muntah hingga lemas, lalu tanpa banyak pikir lagi walaupun pada saat itu jam 02 pagi, kami kembali membawa anak kami ke RS "B" Cikini dan kembali kami mengalami kekesalan, anak kami diperlakukan layaknya seperti pasien yang baru masuk RS. Anak kami kembali masuk ICU, kembali harus Infus, puasa, diambil darahnya lagi (meskipun titik venanya sudah habis/tidak ada tempat lagi untuk infus/periksa darah, dan saya juga telah sampaikan mungkin panasnya akibat luka dibelakang kepalanya yang belum sembuh/infeksi), padahal saya sudah protes terhadap dr. jaga pada saat itu bahwa anak saya sebelumnya sudah dirawat hampir sebulan di RS tersebut, dan hasil lab. terakhirnya juga baru kemarin saya ambil dengan hasil "negatif", juga saya kemukakan mengenai luka dibelakang kepalanya yang harus diprioritaskan pengobatannya. Namun karena dr. terus mengemukakan argumennya, akhirnya kami mengalah dan menyerahkan sepenuhnya apapun yang akan dilakukan oleh dr. Dan kembali anak saya dipakaikan selang Oksigen ke hidungnya, lalu dengan alasan "saturasi" nafasnya terus menurun, Tim medis berencana untuk memasang kembali mesin Ventilator pada anak saya, dengan sebelumnya meminta persetujuan saya lagi untuk diambil darahnya sebelum pemasangan mesin tersebut (padahal ketika itu kondisinya terlihat pucat/kuning seperti telah kehabisan darah). Kembali dengan berat hati dan berharap Tim Medis melakukan tindakan yang "benar" untuk anak saya, saya kembali menyetujuinya. Namun belum sempat mesin itu dipasang, belum sempat hasil lab I dan ke II (pengambilan darah pada pada hari itu) ada hasilnya, akhirnya anak saya dipanggil oleh yang Maha Kuasa ...... anak saya mengalami Gagal Nafas dan dinyatakan Meninggal oleh pihak RS, walau saat itu saya pegang denyut Nadi di leher/bawah dagunya masih ada (walau lemah), sewaktu kami minta untuk terus memompa alat bantu nafas manualnya, Dokter/suster yang ada pada saat itu sudah lepas tangan dan tidak melakukan tindakan apapun juga. Akhirnya dengan Ikhlas, didepan mata kepala saya dan istri saya, anak kami melepaskan nyawanya tanpa kami bisa berbuat apapun juga (Selasa 12 April 2005 Jam 23.25 wib). Akhirnya Anak kami meninggal dengan sebab bukan karena penyakitnya (Panas), menurut kami "kemungkinan" karena gagal nafas/Infeksi paru atau malah "mungkin" karena terlalu lemah kehabisan darah.
Innalillahi Wa inna illaihi roji'un selamat jalan Permata hatiku, ........ doa kami 'kan selalu menyertaimu...Amin
Dan tidak lupa saya & keluarga mengucapkan terimakasih yang sebesar-besarnya kepada rekan-rekan yang telah memberikan suport baik moril, materil maupun spirituil kepada saya dan keluarga, semoga segala kebaikan rekan-rekan akan dibalas dengan pahala yang berlipat-lipat oleh Tuhan Yang Maha Kuasa. Amin.

Salam, Istriyanto & Keluarga
Note :
Tanpa mengurangi rasa hormat saya pada Ilmu Kedokteran dan tenaga medis, sesuai dengan pengalaman berharga dan mahal yang telah saya alami, maka kami mencoba mengambil kesimpulan (Setelah kami juga mendengar dari sesama Pasien RS, rekan/sahabat, tetangga, saudara yang sempat bezuk dan mengatakan pada saya, selama dalam perawatan sampai saat Meninggalnya anak saya) sbb:
1. Banyak kasus penyakit bayi/balita yang timbul setelah mereka disuntik imunisasi.
- Pasien lain di RS yang sama mengatakan pada saya, anak saudaranya sampai dengan usia 2 tahun belum pernah suntik Imunisasi Hepatitis namun, setelah ada dokter (spesialis anak) yang tahu, lalu disarankan di imunisasi Hepatitis, kemudian tidak lama setelah itu akhirnya anak saudaranya positif terkena Hepatitis akut, dan harus bolak-balik berobat ke dokter.
- Tetangga saya, sehabis Imunisasi campak, dua hari kemudian malah terkena campak.
- Tetangga kami yang lain, anak pertamanya rutin diimunisasi, namun phisiknya malah lemah sering sakit-sakitan, sedangkan anak keduanya sama sekali tidak pernah imunisasi namun malah sehat, hampir tidak pernah sakit (kalaupun sakit cepat sembuh/ringan)
- Teman sekolah saya anaknya tidak pernah Imunisasi malah sehat, umur 10 bulan sudah lincah berjalan, dan juga boleh dibilang tidak pernah sakit (kalaupun sakit hanya ringan saja).
- dan banyak lagi kasus-kasus serupa yang tidak mungkin saya tulis satu persatu.
2. Menurut saya, Jika bisa Hindari Imunisasi, kalaupun perlu/terpaksa pilihlah imunisasi yang pokok saja (bukan imunisasi lanjutan/yang aneh-aneh) alasannya :
- Kita "Mendzolimi", anak kita sendiri yang memang sedang masa pertumbuhan dan pertahanan tubuhnya masih lemah, malah kita suntikan penyakit (walaupun sudah dilemahkan) ke tubuhnya.
- Kita tidak pernah tahu kondisi anak kita sedang benar-benar sehat atau tidak, karena terutama anak yang masih di bawah 1 tahun biasanya belum bisa bicara mengenai kondisi badannya, sedangkan imunisasi harus dilakukan pada bayi/balita yang sehat (tidak sedang lemah fisiknya/sakit).
- Sesudah kita memasukan penyakit ke tubuh anak kita, biasanya kita juga harus mengeluarkan banyak biaya. (Jasa dokter/RS, harga imunisasi, dsb),
- Tidak ada jaminan (Dokter/RS/puskesmas) apabila setelah imunisasi anak kita bebas dari penyakit yang telah dimasukan ketubuhnya. Contoh nyata yang terjadi pada anak saya, padahal anak saya sudah 2 kali imunisasi HIB ketika berusia +/- 5 dan 7 bulan ), padahal sebelumnya dokter bilang imunisasi HIB untuk menghindari penyakit Radang Otak, namun nyatanya anak saya malah meninggal akibat penyakit Radang Otak.
- Menurut seorang rekan yang pernah membaca Literatur terbitan Prancis, justru Imunisasi sudah tidak populer di Amerika Serikat, dan terus berusaha dihilangkan dan tidak dipergunakan lagi, bahkan di Israel Imunisasi telah di STOP samasekali, padahal kita tahu negara-negara itu merupakan pelopor "industri", imunisasi.
- Menurut pengalaman saya jumlah kadar/isi setiap pipet/tabung imunisasi semua sama, jadi imunisasi tidak melihat berdasarkan berat tubuh/perbedaan Ras/warna kulit, padahal kalau Obat/Imunisasi itu Impor, tentulah kadarnya disesuaikan dengan berat/fisik orang Luar (Barat) yang jelas lebih basar dan kuat fisiknya dibanding orang Asia, namun kita malah sama-sama menggunakan dengan takaran yang sama. (akibatnya overdosis).
3. Jika tidak "urgent" sekali, hindari rawat inap di RS, karena banyak prosedur/step-step pengobatan yang akhirnya akan melemahkan tubuh pasiennya. (Contoh: keharusan berpuasa, pemasangan infus, pengambilan darah yang terus menerus, foto Rontgen, operasi, kemoteraphy, dsb). Jikalau perlu coba dulu dengan cara pengobatan alternatif/tradisional.
4. Jika perlu dengan tegas untuk menolak suatu tindakan medis yang akan dilakukan RS, jika kita yakini manfaatnya tidak benar-benar berpengaruh terhadap kesembuhan pasien.
5. Jika perlu lakukan 2nd opinion pada RS/dokter lain yang setara/lebih baik.
6. Banyak tanya, biarlah kita dibilang "bawel", tanyalah setiap tindakan medis yang akan dilakukan, mengapa akan di lakukan, akibat-akibatnya, ada tidak cara-cara lain/alternatif lain yang lebih baik/tidak terlalu menyakiti pasien.
7. Terus temani pasien (bisa bergantian dengan keluarga yang lain), karena setiap saat bisa ada tindakan medis yang memerlukan persetujuan, dan cermati semua pekerjaan perawatannya, jika ada yang habis/kurang jangan sungkan melaporkan ke tenaga medis yang ada segera.
8. Terus berdoa, karena segala sesuatunya telah ditetapkan oleh "Yang Maha Kuasa", manusia hanya bisa ikhtiar dan berusaha.
Diambil dari Forum Diskusi:
Brawijaya Forum: http://forum.brawijaya.ac.id/index.php?action=vthread&forum=6&topic=138

http://www.akhirzaman.info/menukonspirasi/depopulasi/vaksin/1261-berbagi-pengalaman-kisah-nyata-imunisasi

Hati-hati pada Dokter?

From: Billy N.
"mailto:billy@konsulsehat.web.id">billy@konsulsehat.web.id
Reply-to: "http://health.groups.yahoo.com/group/sehat/"
Date: Sat, Mar 7, 2009

halo rekan-rekan...Ini tulisan yang mungkin 'aneh', saya sebagai seorang dokter justru meminta rekan-rekan untuk berhati-hati pada dokter. Ini mengikuti tulisan Pak Irwan Julianto di Kompas 4 Maret 2009 lalu, yaitu mengenai 'caveat venditor' (produsen/penyedia jasa berhati-hatilah). Link-nya di situs
Kompas: http://www.kompas.com/read/xml/2009/03/04/16255199/kontroversi.puyer.dan.polifarmasiCeritanya begini, beberapa hari ini saya mengurusi abang saya yang sakit demam berdarah (DBD). Saya buatkan surat pengantar untuk dirawat inap di salah satu RS swasta yang terkenal cukup baik pelayanannya. Sejak masuk UGD saya temani sampai masuk ke kamar perawatan & tiap hari saya tunggui, jadi sangat saya tau perkembangan kondisinya.Abang saya paksa dirawat inap karena trombositnya 82 ribu, agak mengkuatirkan, padahal dia menolak karena merasa diri sudah sehat, nggak demam, nggak mual, hanya merasa badannya agak lemas. Mulai di UGD sudah 'mencurigakan' , karena saya nggak menyatakan bahwa saya dokter pada petugas di RS, jadi saya bisa dengar berbagai keterangan/penjelas an & pertanyaan dari dokter & perawat yang menurut saya 'menggelikan' . Pasien pun diperiksa ulang darahnya, ini masih bisa saya terima, hasil trombositnya tetap sama, 82 ribu.Ketika Abang akan di-EKG, dia sudah mulai 'ribut' karena Desember lalu baru tes EKG dengan treadmill dengan hasil sangat baik. Lalu saya tenangkan bahwa itu prosedur di RS. Yang buat saya heran adalah Abang harus disuntik obat Ranitidin (obat untuk penyakit lambung), padahal dia nggak sakit lambung, & nggak mengeluh perih sama sekali. Obat ini disuntikkan ketika saya ke mengantarkan sampel darah ke lab.Oleh dokter jaga diberi resep untuk dibeli, diresepkan untuk 3 hari padahal besok paginya dokter penyakit dalam akan berkunjung & biasanya obatnya pasti ganti lagi. Belum lagi resepnya pun isinya nggak tepat untuk DBD. Jadi resep nggak saya beli. Dokter penyakit dalamnya setelah saya tanya ke teman yang praktik di RS tersebut dipilihkan yang dia rekomendasikan, katanya 'bagus & pintar', ditambah lagi dia dokter tetap di RS tersebut, jadi pagi-sore selalu ada di RS.Malamnya via telepon dokter penyakit dalam beri instruksi periksa lab macam-macam, setelah saya lihat banyak yang 'nggak nyambung', jadi saya minta Abang untuk hanya setujui sebagian yang masih rasional.Besoknya, saya datang agak siang, dokter penyakit dalam sudah visite & nggak komentar apapun soal pemeriksaan lab yang ditolak. Saya diminta perawat untuk menebus resep ke apotek. Saya lihat resepnya, saya langsung bingung, di resep tertulis obat Ondansetron suntik, obat mual/muntah untuk orang yang sakit kanker & menjalani kemoterapi. Padahal Abang nggak mual apalagi muntah sama sekali. Tertulis juga Ranitidin suntik, yang nggak perlu karena Abang nggak sakit lambung. Bahkan parasetamol bermerek pun diresepkan lagi padahal Abang sudah ngomong kalau dia sudah punya banyak.Saya sampai cek di internet apa ada protokol baru penanganan DBD yang saya lewatkan atau kegunaan baru dari Ondansetron, ternyata nggak. Akhirnya saya hanya beli suplemen vitamin aja dari resep.Pas saya serahkan obatnya ke perawat, dia tanya 'obat suntiknya mana?', saya jawab bahwa pasien nggak setuju diberi obat-obat itu. Perawatnya malah seperti menantang, akhirnya dengan terpaksa saya beritau bahwa saya dokter & saya yang merujuk pasien ke RS, Abang menolak obat-obat itu setelah tanya pada saya. Malah saya dipanggil ke nurse station & diminta tandatangani surat refusal consent (penolakan pengobatan) oleh kepala perawat.Saya beritau saja bahwa pasien 100% sadar, jadi harus pasien yang tandatangani, itu pun setelah dijelaskan oleh dokternya langsung. Sementara dokter saat visite nggak jelaskan apapun mengenai obat-obat yang dia berikan. Saya tinggalkan kepala perawat tersebut yang 'bengong'.Saat saya tunggu Abang, pasien di sebelah ranjangnya ternyata sakit DBD juga. Ternyata dia sudah diresepkan 5 botol antibiotik infus yang mahal & sudah 2 dipakai, padahal kondisi fisik & hasil lab nggak mendukung dia ada infeksi bakteri. Pasien tersebut ditangani oleh dokter penyakit dalam yang lain. Saat dokter penyakit dalam pasien tersebut visite, dia hanya ngomong 'sakit ya?', 'masih panas?', 'ya sudah lanjutkan saja dulu terapinya', visite nggak sampai 3 menit saya hitung.Besoknya dokter penyakit dalam yang tangani Abang visite kembali & nggak komentar apapun soal penolakan membeli obat yang dia resepkan. Dia hanya ngomong bahwa kalau trombositnya sudah naik maka boleh pulang. Saya jadi membayangkan nggak heran Ponari dkk laris, karena dokter pun ternyata pengobatannya nggak rasional. Kasihan banyak pasien yang terpaksa diracun oleh obat-obat yang nggak diperlukan & dibuat 'miskin' untuk membeli obat-obat yang mahal tersebut. Ini belum termasuk dokter ahli yang sudah 'dibayar' cukup mahal ternyata nggak banyak menjelaskan pada pasien sementara kadang kala keluarga sengaja berkumpul & menunggu berjam-jam hanya untuk menunggu dokter visite.Abang sampai ngomong bahwa apa semua pasien harus ditunggui oleh saudaranya yang dokter supaya nggak dapat pengobatan sembarangan? Abang juga merasa bersyukur nggak jadi diberi berbagai macam obat yang nggak dia perlukan & jadi racun di tubuhnya. Sebulan lalu pun saya pernah menunggui saudara saya yang lain yang dirawat inap di salah satu RS swasta yang katanya terbaik di salah satu kota kecil Jateng akibat sakit tifoid. Kejadian serupa terjadi pula, sangat banyak obat yang nggak rasional diresepkan oleh dokter penyakit dalamnya.Kalau ini nggak segera dibereskan, saya nggak bisa menyalahkan masyarakat kalau mereka lebih memilih pengobatan alternatif atau berobat ke LN. Semoga bisa berguna sebagai pelajaran berharga untuk rekan-rekan semua agar berhati-hati & kritis pada pengobatan dokter.
rgds
Billy
Kunjungi http://konsulsehat.web.id/

URINE CULTURES

PRINCIPLE

Urine specimens are submitted for culture from patients with symptoms of urinary tract infections and from asymptomatic patients with a high risk of infection. The most common gram-negative bacteria found in a urine culture are: Escherichia coli, Enterobacteriaceae sp. Klebsiella spp., Proteus spp., and Staphylococcus saprophyticus.

Quantitative cultures of urine specimens are critical for diagnosis of UTI. The criteria to be used for distinguishing significant from non-significant growth may vary depending on the patient and type of urine specimen received for culture.

MATERIALS AND EQUIPMENT

1. Media
BA
MAC

2. Supplies
Sterile urine collection cups
Platinum or plastic disposable calibrated loops (0.001-ml for colony counts>1,000 CFU/ml)

3. Reagents
Gram stain reagents
Reagents specified in preliminary identification protocol
API 20E

4. Equipment
Non-CO2 incubator
Microscope

SPECIMEN

1. Specimen collection – Urine is normally a sterile body fluid. However, unless it is collected properly, it can become contaminated with normal flora from the urethra, vagina, prostate or perineum. Laboratory staff must provide detailed instructions to the patients to ensure proper specimen collection.

Clean-catch midstream urine or catheter urine. See Specimen Collection section of this manual for more complete instructions.

2. Timing and transport
a. First morning specimen is best. Excessive fluid intake will dilute the colony count to <105>

b. Transport urine to laboratory as soon as possible after collection.
c. Culture urine specimens within 2 h, or refrigerate and culture within 24 h. Bacterial counts usually remain stable for 24 h at 4oC.
d. Request a repeat specimen when the collection time and method of collection have not been provided.
e. If an improperly collected, transported, or handled specimen cannot be replaced, document in the final report that specimen quality may have been compromised.
QUALITY CONTROL
Inspect calibrated loops regularly to confirm that they remain round and are free of bends, dents, corrosion, or incinerated material. Additionally, at least monthly, check the loops to ensure that the delivery volume is accurate using the drill bit method: Drill bit method: Obtain two twist drill bits (no. 53 or 54). Carefully slip the 0.001-ml loop over the end of the no. 54 bit. If the loop is calibrated, it will fit over the bit. Repeat the procedure with the no. 53 bit. If the loop is calibrated, it will not fit over the end. Discard the loop if it fits over the no. 53 bit. Perform media, reagent, and stain quality control as directed in the Quality Control SOP.
GRAM STAIN (done by request only)
1. The Gram stain method can detect the presence of both bacteria and WBC’s in urine specimens. If an order is received consult with medical provider.
2. If the intent is to determine if there is a high colony count infection, place 0.01 ml of well mixed, uncentrifuged urine onto a glass slide, allow it to air dry without spreading, and Gram stain. (Refer to Gram Stain SOP). Report the number of microorganisms per oil immersion field (OIF). The presence of one or more microorganisms per OIF correlates with a colony count of > 105 CFU/mL. Report and quantitate WBC’s and organisms seen. The presence of many squamous epithelial cells and different microbial morphotypes indicates contamination or “dirty-catch”. Request a repeat specimen.
3. If the intent of the requisition is to establish whether the infection is Gram-positive or Gram
negative, Grams stain the sediment of urine that has been centrifuged at 1500 g for 5 minutes. Evaluate the organisms OIF. Report whether the organisms are Gram-positive or Gram-negative.

INOCULATION AND INCUBATION

SURFACE STREAK METHOD

The standard choice of media used for initial inoculation of urine is: BA (non-selective media), and MAC. The proper procedure for inoculating urine specimens with a calibrated loop onto culture medium is as follows:

1. Flame and cool a platinum loop calibrated to deliver 0.001 ml (alternatively, a commercially purchased calibrated disposable plastic loop delivering 0.001 ml may be used.)

2. After mixing the urine, remove the top of the container.

3. Holding the cooled loop vertically, immerse the loop below the surface of the urine specimen and subsequently remove the loop vertically.

4. Inoculate the urine on the agar by making a single line steak down the middle of the plate from top to bottom.

5. Beginning at the top of the plate, streak the urine back and forth across the inoculum line, filling the plate with streak lines.

6. Then streak the plate at right angles to the initial streak to produce isolated colonies.
7. Incubate both culture plates at 35 to 37o C in an aerobic atmosphere for 18-24 h.



EXAMINATION OF CULTURE MEDIA

1. Examine cultures that have been incubated overnight.

2. If there is no visible growth and the specimen was collected by voiding or with a catheter, report as follows: “No growth at 24 hours”

3. Re-incubate culture plates with tiny or scant colonies that are not discernible.

4. For positive cultures, examine culture plates for the quantity and morphological type of organisms present. The BA plate is used for the total bacterial count. MAC is inhibitory and could give erroneous quantitative results. MAC should only be used for the presumptive identification of gram-negative rods. A total colony count is performed and the CFU/mL of urine is calculated. Using a 0.001-ml loop, one colony equals 1,000 or 103 CFU/mL (10 colonies would be equal to 10,000 or 104 CFU/ml).

5. Perform additional testing based on the colony count and morphology, method of urine collection, and clinical condition. In routine “clean catch” urine specimens colony counts of 100,000 or 105 CFU/mL or greater are considered significant. Counts of 103 – 105 CFU/mL may also be considered significant from patients on antimicrobial agents, female patients with urethritis, symptomatic males, and dilute urines. Consult with the medical provider as required.

6. In general when there are three or more colony types of organisms grown, regardless of the colony count, it indicates that the specimen was contaminated during collection. This is especially true if the organisms are common vaginal flora such as Lactobacillus sp. Other common contaminants include diphtheroids, viridans streptococci, and coagulase negative staphylococci other than Staphylococcus saprophyticus.

INTERPRETATION

Colony counts should be correlated with clinical criteria to confirm a diagnosis of urinary tract infection (UTI).

1. No Growth

Final report: “No growth at 48 hours”.

2. Colony count <>
3. Colony count of 5,000 to 50,000 CFU/ml (10 to 50 colonies)
a. If mixed: Final report: “Multiple microorganisms present: probable contamination; please repeat culture”. NOTE: A colony count is reflective of one organism. Each organism has its own colony count. Do not use a total cumulative count when more than one organism is isolated.
b. If pure culture of one or two potential pathogens equally predominant
· For patients on antimicrobial agents, female patients with urethritis, and symptomatic males, enumerate and perform definitive identification and antimicrobial susceptibility testing (AST), if indicated. (Refer to Antimicrobial Sensitivity SOP).
· If one organism is predominant and the other is “few”, work up only the predominant organism). Final report: Enumeration CFU/ml and report organism ID and AST results for each organism.
· If no clinical information is provided, enumerate and provide a descriptive identification of colony morphology for organism present. Hold the culture at room temperature for possible further workup if requested by medical provider.
4. Colony count 50,000 to >100,000 CFU/ml (more than 50 colonies)

a. If mixed:

Final report: “Multiple microorganisms present: probable contamination; please repeat culture”.

b. If pure culture of one or two potential pathogens equally predominant

· Perform definitive identification and antimicrobial susceptibility testing (AST), if indicated. (Refer to Antimicrobial Sensitivity SOP).

· If one organism is predominant and the other is “few”, work up only the predominant organism).

Final report: Enumeration CFU/ml and report organism ID and AST results for each organism.

PROCEDURE NOTES

1. Bacteria in urine may settle to the bottom of the specimen container. Therefore, mixing the specimen prior to sampling is extremely important.

2. A quick visual estimation of the number of colonies of each organism is sufficient.

3. If there is a question on which guideline applies to a given culture result, choose the guideline involving more identification and sensitivity testing.

4. The guidelines for working up cultures are only approximations. They must be modified to fit unusual clinical situations.

5. Do not perform AST directly from the urine specimen.

IDENTIFICATION

1. For any urine cultures that grow a significant Stahyococcus coagulase negative, Staph. saprophyticus should be ruled out. It is a very important pathogen among young sexually active females. Staph. Saprophyticus is novobiocin resistant by Kirby-Bauer testing using a disc of 5 ug (<16>
2. If growth occurs on both plates and the colonies are morphologically similar, then it is safe to assume the organism is of the Enterobacteriaceae family (gram negative). Identification may be made using the API test procedure. Perform antibiotic sensitivity.
3. Quick ID’s: The colony morphology and spot indole test can be used to make presumptive identifications of E. coli, Klebsiella-Enterobacter spp., and Proteus (Refer to Spot Indol procedure in SOP). Refer to flowcharts found in “Processing Culture” procedure and/or Table 1.
· E. coli – Will have a flat pink colony morphology on MAC, and will sometimes be beta hemolytic on BA. E.coli will also be indole positive. If the isolate has these characteristics and a typical smell and colony morphology the isolate may be called an E.coli.
· Proteus spp. – Produce a foul odor and tend to produce a film of swarming growth that covers the surface of the BA plate. On MAC, these organisms are non-lactose fermenters colonies (colorless) and may be either indole-positive or indole-negative when tested from blood agar. If indole positive, it can be called P. vulgaris. If indole negative, it can be called P. mirabilis.
· Klebsiella spp. and Enterobacter spp. – Usually large, mucoid, and pink on MAC. These species are usually spot indole negative.
4. Quick ID - Pseudomonas aeruginosa – Will be a non-lactose fermenter on MAC and will have a very typical colony morphology on BA. On BA the organism may or may not b beta hemoloytic, it will have blue or green pigment, “grape-like” odor, and a spreading colony type. The isolate will also be oxidase positive. If the organism has these characteristics, it can be called a P. aeruginosa.
5. If there is growth on the BA but not on MAC, a gram stain should be done on the organism to determine its gram reaction. See Table 2.
6. For Enterococcus sp., susceptibilities should not be done for outpatients. Simply report the drugs of choice and hold the plates for 3 days. If heavy growth on a repeat culture, a sensitivity can probably be done on a MH plate. Drugs of choice are for an uncomplicated UTI is ampicillin. Alternates are nitrofurantoin and levofloxacin.
7. Gram-positive rods frequently isolated but rarely involved in urinary tract infections are Corynebacterium sp. (diphtheroids) and Lactobacillus sp. These organisms will appear as tiny, nondescript colonies on BA and will not grow on MAC.
8. When yeast are isolated that have “spiking” or “feet” around the colonies, this will give a presumptive identification of C. albicans. For yeast that are very tiny on the BA (even after two days incubation) and the individual yeast cells are quite small (by gram stain or wet prep), a presumptive identification can be determined for Torulopsis glabrata. If possible, differentiate between the two yeasts; it could be clinically significant and very helpful to the medical provider. Report only when the amount is moderate to many. Report the yeast only when the amount is moderate-many.
9. Report any amount of Group B streptococcus isolated on women known to be pregnant or on any woman of child bearing age.
LIMITATIONS
1. Because most antibiotics concentrate in urine, negative urine cultures are possible following treatment of a urinary tract infection by an antibiotic that is only partially effective. For this reason, urine cultures collected to determine whether a course of therapy was effective should be collected 7 days after discontinuance of the antibiotic.
2. Improper specimen collection and/or allowing the urine to remain at room temperature for extended periods of time results in false positive cultures. The laboratory can prevent issuance of false positive reports, to a degree, by rejecting polymicrobial specimens.
3. Failure to obtain separation of colonies on primary plating will produce erroneous colony counts.
REFERENCE
1. Barry, A.L. et al. Cumitech 2. Laboratory diagnosis of urinary tract infections. Washington, American Society for Microbiology, 1975.
2. Baron, E.J., and S.M. Finegold. Bailey and Scott’s Diagnostic Microbiology, 8th ed. St. Louis, C.V. Mosby Co., 1990.
3. Clarridge, J.E., Johnson, J.R., Pezzlo, M.T. 1998. Cumitech 2B, laboratory Diagnosis of Urinary Tract Infections, Coordinating ed., A.S. Weissfield. ASM, Washington, D.C.
4. Miller, J.M.: B.B. Wentworth. Methods for quality control in diagnostic microbiology. APHA, Washington, D.C., 1985, pp. 89-134.
5. Miller, J.M. Handbook of Specimen Collection and handling in Microbiology. Atlanta, Centers for Disease Control, PHS, HHS, 1985.
6. Murray, P., Baron, E.J., Pfaller, M.A., Tenover, F.C., Yolken, R.H. 1999. Manual of Clinical Microbiology, 7th Edition. The ASM Press, Washington, D.C.

SCREENING AND DIAGNOSIS OF GESTATIONAL

INTRODUCTION

Glucose intolerance during pregnancy is associated with an increase in perinatal morbidity and mortality, especially in women who are:

• Aged >25 years
• Member of an ethnic group with high prevalence of diabetes (e.g., Hispanic, African, Native American, South or East Asian, Pacific islander)
• Body mass index > 25
• Previous unexplained perinatal loss or birth of a malformed child
• History of abnormal glucose tolerance
• Previous large baby (greater than 9 lbs.)
• Family history of diabetes, especially in first degree relatives
• Abnormal birth weight (<> 9 lbs)
• Polycystic ovary syndrome

Hyperglycemia during pregnancy affects 2-3% of pregnant women; most will return to normal after delivery. Most patients with GDM have normal fasting glucose levels, thus some challenge of glucose tolerance must be undertaken. It is therefore recommended that universal screening and diagnosis be performed between 24 and 28 weeks gestation on all pregnant women not identified as having glucose intolerance. Women with a family history of diabetes or previous gestational diabetes should undergo the screening test earlier in pregnancy (14 to 20 weeks) and again at 24 to 28 weeks of gestation.

SCREENING PROCEDURE

1. Patient Preparation:
Explain test purpose (to evaluate abnormal carbohydrate metabolism) and the procedure. No fasting is required. Test performed without regard to time of day or time of last meal. Patient should not eat, drink, or chew gum during the test. She may void if necessary.

2. Have patient ingest 50 gm of oral glucose (usually chilled glucola).

3. One hour after ingestion, measure patient’s serum glucose.

4. Patient aftercare: Normal activities, eating, and drinking may be resumed.

5. Normal Values: <> 140 mg/dL (nonfasting) / > 130 mg/dL (fasting) and <> 126 mg/dL are diagnostic of diabetes.

DIAGNOSIS PROCEDURE

1. Perform in the morning after a 10-16 hour fast.
Note: This is often done after a 3-day 150-gm carbohydrate/day diet.

2. Measure fasting serum glucose

3. Have patient ingest 100 gm of glucose orally within 5 minutes

4. Measure serum glucose hourly for 3 hours – Fasting, 1 hour, 2 hour, 3 hour

5. The patient should not smoke, drink coffee, or exercise during the testing process other than to walk around. If autonomic nervous system responses develop during testing (pallor, sweating, nausea, fainting, etc.), testing should be discontinued after a sample is taken. The test should be repeated at another time.

6. Normal venous glucose values:

Fasting <95 mg/dL
1 hour <180 mg/dL
2 hour <155 mg/dL
3 hour <140 mg/dL

7. If two or more of the four values are met or exceeded a diagnosis of gestational diabetes can be made.

8. If results are normal in a clinically suspicious situation, repeat during the third trimester.

REFERENCE

1. Fischback, T, Dunning, MB III. Manual of Laboratory Diagnostic Tests, LW & W, Philadelphia, PA, 7th Ed, 2003.

2. Star, Winifred. Ambulatory Obstetrics, Univ. of California San Francisco; 3rd Ed, 1999.

3. Tietz NW. Textbook of clinical Chemistry, 3rd Ed. WB Saunders. Philadelphia: 1815; 1999.

4. Wallace, J. Interpretation of Laboratory Tests, LW & W, Philadelphia, PA, 7th ed. 2000.

Fakta dibalik Golongan Darah


Mungkin kita tidak asing lagi dengan golongan darah A, B, AB dan O. Tapi sebenarnya bukan O tapi 0 (nol).

Golongan Darah A : Memiliki sel darah dengan antigen A
Golongan Darah B : Memiliki sel darah dengan antigen B
Golongan Darah AB : Memiliki sel darah merah dengan antigen A dan B
Golongan Darah 0 : Memiliki Sel darah tanpa antigen
Jadi penyebutannya itu berasal dari antigen yang dimilikinya. Disebut A karena memiliki antigen A, B karena antigennya B, AB karena punya A dan B, sedangkan 0(nol) karena tidak memiliki antigen. Namun karena dalam bahasa Inggris 0 (nol) sering dibaca O, maka mereka membacanya O. Tapi maksud sebenarnya adalah nol.

Persepsi keliru golongan darah
Saat ini mungkin masih banyak yang beranggapan bahwa golongan darah O bisa dipakai untuk penderita golongan darah lain (A, B, dan AB), karena itu golongan darah O disebut sebagai Universal Donor. Itu tidak benar. Karena pemberian golongan darah O kepada golongan lain berhubung pada kenyataan sering menimbulkan efek sampingan pada penderita. Terlebih bila di dalam plasma donor golongan 0 ini terdapat anti A dan anti B yang bertiter tinggi (1/64). Di negara-negara lain anggapan golongan darah O sebagai Universal Donor tidak dianut lagi, kecuali kalau diberikan dalam bentuk Packed Red Cells. Namun anehnya mengapa ini masih diajarkan di pelajaran sekolah di Indonesia??? Memang secara teori dulu seperti itu. Tapi ilmu pengetahuan sekarang sudah lebih baik lagi melihat reaksi serius yang ditimbulkan.

G.B Elliott dalam jurnalnya “Transiently Dangerous Universal Blood Donor” mengatakan bahwa Universal Donor itu berbahaya. Dan sebenarnya pernyataan “Dengerous Universal Donor” ini sudah diperkenalkan oleh Levine dan Mabee di tahun 1923.
Penerapan Universal Donor mungkin hanya bisa diterapkan untuk keadaan gawat darurat, dimana pasokan darah tipe yang sama sangat sulit didapatkan.

Jumlah Pemilik Golongan Darah
Sering timbul pertanyaan, golongan darah apa sih yang terbanyak dan terlangka?Untuk Indonesia, menurut jumlah anggota golongandarah.net :
O : 568
B : 401
A : 325
AB : 203
Sedangkan di seluruh Dunia. Rata-rata populasi terbanyak adalah golongan darah O, disusul A, B, lalu AB.

Golongan Darah Terlangka
Sebenarnya ada satu golongan darah yang tidak masuk dari 4 jenis diatas, yaitu Bombay Blood. Dari namanya sudah dapat ditebak. Bombay, itu nama kota di India. Diberi nama Bombay karena pertama kali diketemukan pada tahun 1952 di Bombay, India. Darah ini sangat langka, hanya timbul 1 dari 250.000. Golongan O biasanya mengandung H substance yang paling banyak. Karena itu sel O bereaksi paling kuat dengan anti H, tetapi Bombay Blood Oh justru sama sekali tidak memberikan reaksi dengan anti H. Sel Oh Bombay Blood ini tidak beraksi dengan anti A, anti B dan anti H. Bombay Blood terjadi karena mutasi fucosyltransferase. Karena itu mungkin mereka memiliki jenis darah yang berbeda.

Di Indonesia ada dua kasus yang ditemukan di LPTD-PMI Jakarta dimana kasus pertama N K seorang anak perempuan dengan golongan darah O, berumur satu tahun, dan A K juga seorang anak wanita, dengan golongan darah O, berumur delapan tahun. Coba bayangkan betapa kasiannya anak-anak itu jika tidak menemukan donor yang sesuai.

Cara Mudah Mencari Donor Darah
Jika hanya mengandalkan darah yang ada di PMI, mungkin sangat sulit didapat. Mengingat persediaan darah di PMI terbatas. Karena itu perlu adanya database Online untuk memudahkan mengetahui siapa saja yang memiliki golongan darah yang dibutuhkan. Hal ini sangat membantu ketika keadaan gawat darurat. Tidak perlu repot-repot mengirim SMS, menyebarkan pamflet, dll. Cukup akses ke http://www.golongandarah.net/ maka anda akan menemukan ribuan donor yang terdaftar disana, dan sudah dipilah menurut kota tempat tinggalnya. Untuk melengkapi database yang telah ada, daftarkan diri anda ke http://www.golongandarah.net/. Partisipasi anda dapat membantu meringankan beban saudara kita yang membutuhkan bantuan darah.

Penulis :Agam Rosyidi
URL :http://rosyidi.com/fakta-dibalik-golongan-darah/

Panel Pemeriksaan Laboratorium


Guna mempermudah dokter atau pelanggan untuk menentukan jenis pemeriksaan laboratorium yang sesuai dengan kondisi kesehatan atau kebutuhannya, maka Laboratorium Klinik Prodia merancang beberapa kumpulan pemeriksaan laboratorium yang disebut sebagai PANEL PEMERIKSAAN LABORATORIUM.

Panel pemeriksaan laboratorium adalah sekumpulan pemeriksaan laboratorium yang dirancang untuk tujuan mendeteksi penyakit, menentukan risiko, memantau perkembangan penyakit, memantau pengobatan, dan lain-lain.

- Tujuan : sebagai panduan untuk mempermudah dokter atau pelanggan menentukan jenis pemeriksaan laboratorium sesuai dengan tujuan pemeriksaan bagi pasien yang bersangkutan.
- Sifat: tidak mengikat, artinya dokter atau pelanggan dapat menambahkan atau mengurangi jenis pemeriksaan laboratorium sesuai kondisi masing-masing pasien.

Berikut ini adalah beberapa panel pemeriksaan laboratorium yang disediakan oleh Laboratorium Klinik Prodia.

:: PANEL CHECK UP KESEHATAN
Tujuan: mengetahui kualitas kesehatan secara umum, baik yang menyangkut fungsi organ maupun kondisi metabolisme tubuh.

Panel Check Up
Hematologi Rutin, Urin Rutin, Faeces Rutin, Bilirubin Total, Bilirubin Direk, GOT, GPT, Fosfatase Alkali, Gamma GT, Protein Elektroforesis, Glukosa Puasa*, Urea N*, HBsAg, Anti-HCV, Kreatinin, Asam Urat*, Cholesterol Total, Trigliserida*, Cholesterol HDL, Cholesterol LDL Direk

Panel General Medical Check Up (tersedia di cabang tertentu)
Panel Check Up + Pemeriksaan Non Laboratorium (pemeriksaan fisik dan tekanan darah, rontgen, EKG)

Panel Check Up Plus
Hematologi Rutin, Urin Rutin, Faeces Rutin, Bilirubin Total, Bilirubin Direk, GOT, GPT, Fosfatase Alkali, Gamma GT, Protein Elektroforesis, Glukosa Puasa*, Urea N*, HBsAg, Anti-HCV, Kreatinin, Asam Urat*, Cholesterol Total, Trigliserida*, Cholesterol HDL, Cholesterol LDL Direk, AFP, PSA (pria), Pap Smear (wanita)

Panel General Medical Check Up Plus (tersedia di cabang tertentu)
Panel Check Up Plus + Pemeriksaan Non Laboratorium (pemeriksaan fisik dan tekanan darah, rontgen, treadmill)

Pemeriksaan Non Laboratorium (tersedia di cabang tertentu)
Pemeriksaan fisik dan tekanan darah, foto dada (rontgen), ultrasonografi (USG), elektrokardiografi (EKG), treadmill

:: PANEL PREMARITAL
Tujuan: mendeteksi adanya penyakit menular, menahun atau diturunkan, yang dapat mempengaruhi kesuburan pasangan maupun kesehatan janin.

Jenis pemeriksaan: Hematologi Rutin, Urin Rutin, Glukosa Puasa*, HBsAg, VDRL/RPR, Golongan Darah (A,B,O) dan Rhesus, Gambaran Darah Tepi, Anti-Rubella IgG (perempuan), Anti-Toxoplasma IgG (perempuan), Anti-CMV (perempuan)

:: PANEL AWAL KEHAMILAN
Tujuan: mengetahui adanya penyakit yang dapat mempengaruhi kesehatan Ibu hamil maupun janinnya.

Jenis pemeriksaan: Hematologi Rutin, Urin Rutin, Glukosa Puasa*, Glukosa 2 jam PP, HBsAg, Golongan Darah (A,B,O) dan Rhesus, VDRL/RPR, Anti-Rubella IgG & IgM, Anti-Toxoplasma IgG & IgM, Anti-CMV IgG & IgM, Anti-HSV2 IgG & IgM

:: PANEL TORCH
Tujuan: mengetahui adanya infeksi dan status kekebalan terhadap parasit Toxoplasma, virus Rubella, Cytomegalovirus (CMV), dan virus Herpes tipe 2 (HSV2) yang dapat mempengaruhi kesehatan janin.

Jenis pemeriksaan: Anti-Toxoplasma IgG & IgM, Anti-Rubella IgG & IgM, Anti-CMV IgG & IgM, Anti-HSV2 IgG & IgM

:: PANEL PEMERIKSAAN HIPERTENSI EVALUASI AWAL
Tujuan: mencari kemungkinan penyebab hipertensi, menentukan ada/tidaknya komplikasi hipertensi, memperkirakan perjalanan penyakit, serta menentukan faktor risiko lain pada penyakit-penyakit yang menyertai hipertensi.

Jenis pemeriksaan: Hematologi Rutin, Hematokrit, Urin Rutin, Glukosa Puasa*, Glukosa 2 jam PP, Cholesterol Total, Cholesterol HDL, Cholesterol LDL Direk, Trigliserida*, Apo B*, Urea N*, Kreatinin, Asam Urat*, Kalium (serum & urin 24 jam), Natrium (serum & urin 24 Jam, Albumin Urin Kualitatif (Mikroalbumin Kualitatif), Renin (PRA)**

:: PANEL PENGELOLAAN HIPERTENSI
Tujuan: memantau keberhasilan pengobatan hipertensi.

Jenis pemeriksaan: Urin Rutin, Glukosa Puasa*, Cholesterol Total, Cholesterol HDL, Cholesterol LDL Direk, Albumin Urin Kualitatif (Mikroalbumin Kualitatif), Trigliserida*, Apo B*, Urea N*, Kreatinin, Asam Urat*, Kalium, Natrium

:: PANEL PENGELOLAAN DIABETES MELITUS
Tujuan: memantau hasil pengobatan, dan mendeteksi faktor risiko komplikasi Diabetes Melitus.

Jenis pemeriksaan: Glukosa Puasa*, Glukosa 2 jam PP, HbA1c, Kreatinin, Urin Rutin, Trigliserida*, GPT, Cholesterol Total, Cholesterol HDL, Cholesterol LDL Direk, Albumin Urin Kuantitatif (Mikroalbumin Kuantitatif), Albumin/Globulin

:: PANEL LEMAK
Tujuan: mengetahui kadar berbagai jenis lemak yang penting dalam proses terjadinya penyumbatan pembuluh darah (Aterosklerosis).

Jenis pemeriksaan: Cholesterol Total, Cholesterol HDL, Cholesterol LDL Direk, Trigliserida*, Apo B*

:: PANEL SINDROM METABOLIK
Tujuan: mengetahui adanya sindrom metabolik yang merupakan faktor risiko terjadinya penyakit jantung koroner dan stroke, serta diabetes melitus.

Panel Sindrom Metabolik 1
Lingkar Perut, Tekanan Darah, Trigliserida*, Cholesterol HDL, Glukosa Puasa*, Adiponektin

Panel Sindrom Metabolik 2
Lingkar Perut, Tekanan Darah, Trigliserida*, Cholesterol HDL, Glukosa Puasa*, Adiponektin, Cholesterol Total, Cholesterol LDL Direk, hs-CRP, Apo B*, SAT, GPT

:: PANEL UJI SARING VAKSINASI HEPATITIS B VIRUS
Tujuan: mengetahui adanya infeksi dan status kekebalan terhadap virus Hepatitis B.

Jenis pemeriksaan: HBsAg, Anti-HBs, Anti-HBc

:: PANEL RISIKO PJK/STROKE
Tujuan: menentukan dan memperkirakan faktor risiko yang dapat memicu terjadinya penyakit jantung koroner (PJK) dan stroke.

Jenis pemeriksaan: Cholesterol Total, Cholesterol HDL, Cholesterol LDL Direk, Trigliserida*, Apo B*, Lp(a)*, Adiponektin, Glukosa 2 jam PP, Status Antioksidan Total, Fibrinogen, ACA IgG & IgM, Homosistein, hs-CRP, Insulin & Glukosa Puasa*

:: PANEL OSTEOPOROSIS
Tujuan: mendeteksi dini risiko terjadinya pengeroposan tulang/osteoporosis.

Jenis pemeriksaan: CTx, N-MID Osteocalcin

:: PANEL DEMAM
Tujuan: mengetahui penyebab demam.

Jenis pemeriksaan: Hematologi Lengkap, Urin Rutin, Malaria, Widal, Gal Kultur, Anti-Dengue IgG & IgM, CRP Kuantitatif / hs-CRP, GOT, GPT

Keterangan:
* Puasa 12 jam.
** Persiapan khusus, hubungi petugas laboratorium.

Untuk memperoleh hasil pemeriksaan yang handal, persiapkan diri Anda sebaik-baiknya sesuai petujuk berikut ini:

Tata cara persiapan puasa secara umum
1. Pastikan Anda memperoleh asupan karbohidrat yang cukup (paling sedikit 150g/hari) selama 3 hari sebelum pemeriksaan.

2. Puasa selama 12 jam, yaitu sejak malam hari hingga waktu pengambilan darah / bahan pemeriksaan lain.

Selama puasa :

- Tidak boleh makan apapun, termasuk permen karet.

- Tidak minum teh, kopi, susu, dan lain-lain, meski tanpa gula.

- Minum air putih tetap diperbolehkan, terutama bila diperlukan pengambilan bahan pemeriksaan dari urin.

- Tidak merokok.

- Jangan berpuasa lebih dari 14 jam.

3. Tidak berolahraga atau melakukan aktivitas fisik yang berat sejak 12 jam sebelum pengambilan darah.

4. Berhenti minum obat sejak 4-24 jam sebelum pengambilan darah atau 48-72 jam sebelum penampungan urin, kecuali dokter tetap menganjurkan minum obat atau kondisi kesehatan tidak memungkinkan (informasikan hal ini kepada petugas laboratorium).

Sumber: www.prodia.co.id

Pemeriksaan untuk memonitor status HIV bagi ODHA

oleh Sarah Biel-Cunningham, M.S.W.

Tes laboratorium berkala merupakan salah satu bagian terpenting dari perawatan kesehatan HIV. Tes laboratorium ini merupakan bagian dari perencanaan pengobatan yang berfungsi untuk memonitor perkembangan HIV dalam tubuh anda, selain juga memberi informasi untuk membantu dalam penentuan jenis rejimen pengobatan - apakah anda sudah layak memulai pengobatan, menghentikan atau mengubah pengobatan. Komitmen anda untuk secara berkala melakukan monitor hasil laboratorium sangatlah penting untuk dapat memegang kendali terhadap kesehatan anda. Banyak orang merasa perlu untuk mengetahui dan mengerti tentang aspek perawatan kesehatan ini untuk dapat menerima status HIV mereka.
Terdapat beberapa jenis tes laboratorium yang digunakan untuk memonitor HIV. Keempat tes yang paling umum adalah viral load, jumlah CD4, tes darah lengkap dan tes kimia darah. Keempat jenis tes ini adalah tes darah dan merupakan tes paling komprehensif yang ada untuk memonitor kesehatan seeorang dengan HIV. Tergantung dari kesehatan dan apakah anda sedang dalam rejimen pengobatan, kebanyakan dokter akan melakukan tes ini setiap tiga hingga enam bulan. Karena tes-tes ini digunakan untuk memonitor kesehatan anda secara keseluruhan dengan membandingkan dengan hasil-hasil tes yang lalu, sangatlah penting untuk mengetahui kapan anda pertama kali didiagnosa atau kapan anda memulai pengobatan dalam melakukan tes laboratorium sehingga terdapat titik awal untuk perbandingan.
Untuk membaca hasil tes anda, dalam ringkasan laporan biasanya anda dapat melihat daftar jenis tes yang dilakukan, hasil tes tersebut serta rentang angka referensi. Hasil tes biasanya dilaporkan dalam bentuk angka absolut yang diukur per unit tertentu atau dalam persentase, yang kemudian dapat dibandingkan dengan rentang angka referensi yang diberikan untuk jenis tes tersebut. Rentang angka referensi diperoleh dari sampling sejumlah orang-orang sehat untuk menentukan rentang rata-rata. Hasil tes seseorang seharusnya jatuh di antara angka rata-rata tersebut untuk dapat dianggap masuk dalam rentang - normal.

Viral load
Tes ini dilakukan untuk mengukur jumlah HIV dalam darah (kopi/mL). Terdapat dua jenis tes viral load: polymerase chain reaction (PCR) atau branched DNA (b-DNA). Dari ringkasan hasil tes anda dapat mengetahui jenis tes yang digunakan. Walaupun kedua tes ini memberikan kesimpulan yang hampir sama, hasil tes dari dua jenis tes laboratorium ini tidak sebanding. Karenanya, walaupun hasil kedua tes tersebut pada dasarnya memberikan informasi yang sama, sangatlah penting untuk hanya menggunakan salah satu agar memberikan perbandingan yang konsisten.
Tujuan dari tes ini adalah untuk mencapai atau sedekat mungkin mencapai tingkat tidak terdeteksi. Untuk tes viral load PCR, angka yang dianggap tidak terdeteksi adalah kurang dari 50 kopi HIV dalam darah, dan untuk tes viral load b-DNA, angka ini adalah kurang dari 400 kopi HIV dalam darah. Anda disarankan untuk melakukan tes viral load setiap tiga bulan. Butuh waktu antara empat hingga tujuh hari bagi laboratorium untuk memproses hasil tes ini.

Jumlah CD4
Tes ini mengukur jumlah sel CD4 (T sel) dalam tubuh anda, berdasarkan kesehatan sistim kekebalan tubuh anda. Fokus dari tes ini adalah untuk mengukur jumlah CD4 absolut. Jumlah CD4 absolut adalah jumlah sel CD4 yang ada dalam sistim kekebalan tubuh anda. Sel CD4 merupakan bagian dari sistim kekebalan tubuh yang bertugas untuk melawan infeksi dan juga merupakan sel-sel yang secara langsung menjadi sasaran HIV. Dalam perkembangannya, HIV mengambil alih sel CD4, memanfaatkan sel-sel ini untuk bereplikasi, dan dalam proses tersebut membunuh sel CD4 yang asli. Hal inilah mengapa tes jumlah CD4 menjadi indikator yang berguna untuk menentukan kesehatan sistim kekebalan tubuh. Semakin banyak jumlah sel CD4, semakin kuat sistim kekebalan tubuh anda. Biasanya seseorang yang hidup dengan HIV dianjurkan untuk memonitor jumlah CD4 mereka untuk memastikan jumlahnya di atas 200. Namun bila jumlah CD4 anda di bawah 200, anda dianjurkan untuk bekerjasama dengan dokter untuk memulai rejimen pengobatan atau melakukan perbaikan dalam rejimen obat yang kini anda konsumsi. Dengan tes jumlah CD4, anda dianjurkan untuk melakukan tes begitu anda dites positif HIV, kemudian secara berkala tiap tiga hingga enam bulan. Biasanya laboratorium butuh waktu dua minggu untuk memproses tes ini.

Tes darah lengkap
Tes ini mengukur tiap komponen dalam darah. Tes darah lengkap sangat penting karena beberapa jenis obat-obatan dapat menyebabkan rendahnya jumlah darah merah atau darah putih, yang kemudian dapat menyebabkan anemia atau kelainan darah lain. Tes ini mengukur jumlah sel darah putih, hemoglobin, hematocrit dan platelet dalam darah. Dengan menggunakan tes ini, jumlah sel darah putih yang tinggi dapat berarti tubuh melakukan perlawanan terhadap infeksi yang mungkin tidak terdeteksi; jumlah sel darah merah yang rendah dengan hemoglobin dan hematocrit bisa jadi merupakan anemia akibat konsumsi obat HIV; dan jumlah platelet yang rendah dapat mempengaruhi pembekuan darah. Tes ini berbeda dengan tes viral load atau tes jumlah CD4 karena tidak secara langsung memperlihatkan perkembangan berkenaan dengan HIV, tetapi tetap membantu dengan memonitor kesehatan keseluruhan seseorang. Dengan tes darah lengkap dianjurkan anda melakukan tes tiap tiga bulan bila anda dalam rejimen pengobatan. Bila anda tidak mengkonsumsi obat-obatan HIV, tes ini seharusnya menjadi bagian dari tes fisik tahunan anda. Tes ini butuh satu hari untuk diproses laboratorium.

Skrining kimia darah
Tes ini merupakan skrining umum untuk mengukur apakah organ-organ tubuh anda (jantung, hati, ginjal, pankreas), otot dan tulang, bekerja dengan benar dengan mengukur kimia-kimia tertentu dalam darah. Tes ini penting untuk mendeteksi infeksi atau efek samping obat. Salah satu fokus terpenting dalam tes ini adalah monitor ensim hati. Hati merupakan organ tubuh penting karena hati membantu memproses obat-obatan, dan karena obat-obatan ini menuntut lebih banyak dari hati anda, ada kemungkinan terjadi toksisitas hati yang dapat mempengaruhi kesehatan umum anda. Albumin, alkalin, fosfat dan bilirubin juga perlu dimonitor untuk memastikan hati anda bekerja dengan baik. Fokus penting lain adalah untuk memonitor tingkat lipid jantung anda. Tes ini membantu memonitor kolesterol LDL (kolesterol jahat), kolesterol HDL (kolesterol sehat) serta trigliserida. Mengenal jenis-jenis lipid ini sangatlah penting untuk membantu memonitor kemungkinan penyakit jantung. Tes kimia darah ini sebaiknya dilakukan setiap tiga bulan, hasilnya dapat diperoleh dalam dua atau tiga hari kerja.
Tes laboratorium merupakan bagian penting dari perawatan kesehatan komprehensif anda dengan membantu memonitor perkembangan HIV dalam tubuh anda. Tes-tes ini dapat menjadi indikator untuk mendeteksi masalah-masalah kesehatan. Namun, ketika anda menggunakan hasil lab sebagai perbandingan dalam memonitor kesehatan anda, perlu juga untuk memahami bahwa suatu hasil tes yang tidak terduga belum tentu mengindikasikan adanya masalah kesehatan yang serius, yang lebih penting adalah untuk melihat tren dari hasil tes dalam jangka waktu tertentu, daripada hanya berpatokan pada satu hasil tes saja. Selain itu, terdapat banyak faktor dapat membuat hasil tes darah anda berbeda, ingatlah: bila anda tidak nyaman dengan tes darah pertama anda, minta dokter untuk mengulang tes. Penting untuk semua orang untuk memiliki pengertian umum tentang cara membaca ringkasan hasil tes laboratorium. Namun, lebih penting lagi untuk berbicara dengan dokter anda mengenai hasil lab anda dan minta kepadanya untuk mengartikan hasil tes dan bagaimana hasil tersebut dapat mempengaruhi perencanaan pengobatan anda.
[Sumber:
TheBody.com]

http://www.odhaindonesia.org

MICRO HEMATOCRIT

PRINCIPLE

The micro hematocrit represents the volume of circulating blood that is occupied by erythrocytes and is expressed as a percentage. The micro hematocrit test helps the medical provider identify patients at risk of developing anemia and manage patients who have anemia. Anemia is a less than normal number of erythrocytes in the volume of packed cells. The most common cause of anemia throughout the world is iron deficiency. A decrease in the micro hematocrit value results in a lack of energy, a reduced resistance to infections, and an increased risk of abnormality in pregnancy. An increased micro hematocrit value can result from polycythemia, hemoconcentration, and/or cardiac disease.

SUPPLIES AND EQUIPMENT

1. Equipment
High-speed centrifuge
Micro hematocrit tube reader
Timer

2. Materials/Reagents
Capillary tubes (heparinized) if finger stick specimens used
Capillary tubes (nonheparinized) if whole blood is used
Clay to seal tubes
Laboratory tissues
Gloves

3. Preparation– If room temperature EDTA blood is being used the blood should be placed on the blood rocker for 10-15 minutes to allow adequate mixing of the blood cells. If the blood was refrigerated, mix the tube for at least 20 minutes.

4. Performance Parameters–N/A

5. Storage Requirements–Store at room temperature.

SPECIMEN

1. Patient Preparation–N/A

2. Type–Free-flowing capillary or thoroughly mixed anticoagulated venous blood. EDTA is the anticoagulant of choice.

Finger Stick

Refer to detailed description of this technique in Specimen Collection Section.

1. Put on gloves
2. Wipe the finger with alcohol and allow it to dry.
3. Make a puncture wound with a sterile lancet.
4. Check that the patient’s hand is relaxed. Some patients will hold their hand open, but it will be tense. This will prevent blood flow to the small capillaries and will prevent sample collection. It may be necessary to shake the patient’s hand to make it loose.
5. Do not squeeze the finger excessively. This radically alters the relationship between the plasma and the RBCs and will therefore change the micro hematocrit.
6. Wipe away the first drop of blood with a gauze pad.
7. Hold the capillary tube to the puncture site, tilting it in a downward direction. This will allow the tubes to fill much faster.
8. Fill the capillary tube at least three-quarters full, and insert the end of the tube into the clay sealant. Either end of the tube can be put into the sealant, but using the clean end will keep the sealant surface clean. If the other end is used, it should be wiped with a gauze to clean off excess blood from the outer surface of the tube.
9. Repeat the above steps with a second capillary tube.

Heel Stick

Refer to detailed description of the infant heel-stick technique in Specimen Collection Section.

EDTA-Anticoagulated Blood Tube

An accurate micro hematocrit can be obtained using EDTA-anticoagulated blood for up to 24 hours after its collection as long as the sample has been refrigerated. If left at room temperature it is good for only 6 hours.

1. Examine anticoagulated specimens carefully for clots. If the blood has clotted, the test cannot be accurately performed. Blood should be mixed well and at room temperature.
2. Put on gloves.
3. Hold a 2x2 inch gauze around the stopper and gently remove the stopper from the tube. Try to avoid splashing blood.
4. Put the micro hematocrit capillary tubes into the purple-top tube and collect the blood sample. Hold the tube as close to horizontal as possible without spilling the blood. Blood should rise into the tube by capillary action. If this does not happen, tap the top of the capillary tubes several times to speed up the process.
5. Wipe the blood off the outside of the capillary tube with gauze.
6. Place the capillary tubes into the sealant after they are at least three-fourths filled with blood. The more blood in the tube the easier the result is to read and the more accurate is the result.

QUALITY CONTROL

Test is performed in duplicate and results must agree within 2.0%. If not, repeat test.

Paired studies–Run a patient’s blood and send the patient’s sample to a reference laboratory for a complete blood count. The automated hematology equipment calculates the micro hematocrit from the red cell size and the red cell number. This calculated micro hematocrit value would be about 3% less than the micro hematocrit. This is due to the 3% plasma trapping that occurs in even the ideal micro hematocrit technique.

Participation in a proficiency testing survey.

CALIBRATION

It is necessary to perform periodic calibration of the timer (with a stopwatch) and of the centrifuge speed (rotations per minute, RPM). Speed may be calibrated using a tachometer device. If such a device is not available, the performance of the centrifuge can be checked by determining the “constant packing time.” Fill and seal a micro hematocrit tube and take a reading after 2 minutes of centrifugation. Centrifuge again for an additional minute and take a reading. Repeat centrifugation for another minute until there is no change in readings. The results should be recorded. For scheduled cleaning and maintenance, follow the manufacturer’s directions.

PROCEDURE

STANDARD PRECAUTION: Patient specimens and all materials coming into contact with them should be handled as if capable of transmitting infections and disposed of with proper precautions. Gloves should be worn when handling all specimens.

1. Place both capillary tubes in the centrifuge across from each other. The sealed end should be on the outside, as the centrifugal forces press the cells toward the outside of the centrifuge.

2. Place the lid on the centrifuge head. Most centrifuges have a special spin-on head to prevent the capillary tubes from flying out of the head during the centrifugation.

3. Centrifuge the capillary tubes for 5 minutes at a minimum of 15,000 g.

4. Remove the capillary tubes after spinning has stopped. To read the micro hematocrit, place the tube at the right edge of the reader card (see Figure 1) with the top of the plasma line at the 100% mark. Slide the tube to the left until the top of the clay sealant is at the bottom line (0). Check that the top of the plasma is at the 100% line, the bottom of the red cell column is at the 0 line, and the capillary tube is parallel to the edge of the reading card.

5. Carefully find the point where the top of the red cell column crosses the line on the reader card. Do not include the gray buffy coat just above the red cell column as part of the reading. The identified line corresponds to the micro hematocrit value. It may be necessary to use a magnifying glass to accurately identify the top of the red cell column.

6. Repeat the reading process for the second capillary tube. The results should agree within two percentage points. The reported value is the average of those values. If the two values differ by greater than 3 points, the entire procedure should be repeated.

INTERPRETATION

Examination of the micro hematocrit:


· Top of tube – fatty layer and normally barely visible. With lipemia, the layer is several mm thick.
· Second layer is plasma – pale yellow and fairly clear. Excessive hemolysis results in reddish color, and can lower the micro hematocrit. A new specimen should be obtained. Jaundice results in a yellow color.
· Third layer is buffy coat – 0.5 to 1.0 mm thick. If WBC count is over 10,000/cu mm, the layer is usually over 1 mm thick. Packed platelets are found in upper part of the layer and WBC in the lower part.
· Fourth layer is packed red cells – read as the micro hematocrit. A consistent technique for the micro hematocrit should produce a test-to-test variation of only + 2 percent. The largest source of error is the variation between readers in the reading step of the procedure.



FIGURE 1.


CALCULATIONS – N/A

REPORTING

Normal Values
The reference intervals based on Texas Department of Health (TDH) values are:

40-54% males
38-47% females
44-64% newborns
35-49% 14-90 days
30-40% 6 months – 1 year
31-43% 1 year – 10years

PROCEDURE NOTES

1. When collecting the fingertip blood, care should be taken not to squeeze the finger so as to contaminate the collection with tissue juice. This will decrease the micro hematocrit.

2. Capillary tubes should be centrifuged at 15,000g. A decreased centrifuged force will trap plasma between the RBC and cannot be corrected by increasing time. Inadequate centrifugation has stopped, will give falsely elevated readings. The time and speed of centrifugation, therefore, are extremely important in order to obtain maximal red cell packing.

3. An office laboratory may be 3% higher than the calculated hematocrit obtained from a reference laboratory. This is because of the small volume of plasma that is trapped between the red cells during the packing procedure.

4. Air bubbles that occur when filling the micro hematocrit tubes will not affect the final value because the bubbles will be expelled by the red cells as they migrate during the centrifugation process.

5. The microhematocrit is greatly affected by abnormally shaped cells because such cells trap plasma and artificially elevate the value of the micro hematocrit. Patients with distorted cells such as in sickle cell disease should therefore be followed by hemoglobin levels rather than microhematocrit values.

6. A good relationship to keep in mind is that the micro hematocrit is usually three times the value of the hemoglobin value. Another way to describe this relationship is that 1 hematocrit point is equivalent to 0.34 g Hb/dL.

SOURCES OF ERROR

Falsely Low Values

1. Improper reading of the micro hematocrit value from the reader chart
2. Inadequate mixing of an EDTA-anticoagulated tube and drawing of the specimen from the plasma-rich area at the top of the tube
3. Inadequately filling an EDTA tube with blood so that the anticoagulant over dilutes the blood sample
4. Reading the micro hematocrit a long period after the sample has been spun

Falsely High Values

1. Incorrect reading of the micro hematocrit from the reader chart
2. Inclusion of the buffy coat in the reading of the red cell column
3. Inadequate mixing of an EDTA-anticoagulated tube and drawing of the specimen from the cell-rich area at the bottom of the tube
4. Inadequate centrifuge speed or time, resulting in less than maximal packing of the red blood cells
5. Increased plasma trapping because of unusually shaped cells (e.g., macrocytes, sickle cells, poikilocytosis). This can result in as great an increase as 20 percent in extreme cases, such as sickled cells.
6. The use of EDTA-anticoagulated blood that has been stored for greater than 24 hours

REFERENCES

1. Clinical Diagnostics & Management, 18th Ed., Mar 1995, Pg. 583 by J.B. Henry, M.D.

2. Laboratory Test Handbook, 3rd Ed. With Key Word index, 1994, Pg. 578, 581, and 582-583 by Jacobs, Demott, Finley, Horvatm Kasten, Tilzer

3. National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS), Physician’s Office Laboratory Guidelines, 2nd ed. Document POL1-T2. Villanova, PA: June, 1995

THICK AND THIN BLOOD SMEARS FOR DETECTION OF MALARIA, BABESIA, AND OTHER BLOOD PARASITES

PRINCIPLE

Preparation of thick and thin blood smears, appropriate staining procedure and detection and identification of hemo-parasites are crucial to clinical diagnosis of many parasitic diseases. These include species of malaria, trypanosomes, babesias and microfilariae of filarial nematodes. On properly prepared smears hemo-parasites can be identified on the basis of their morphologic features.

CLINICAL SIGNIFICANCE

Malaria infection is the most widespread, fatal human parasitic disease. All of the parasites infecting human blood can cause significant disease and prompt identification and treatment are necessary.

SPECIMEN

1. SLIDE PREPARATION: For making blood smears, use 3” x 1” slides with a frosted end to be used for patient identification. Slides must be free of scratches, grease, dust, and acid or alkali contamination. The recommended procedure is to use new slides, wash them individually in a solution of warm water and detergent with a soft brush or cloth, rinse thoroughly in distilled water, let drain briefly on a clean towel, dip in 100% Reagent Alcohol and dry with lint-free cloth or lens paper. Store cleaned slides in a closed container to protect from dust. Handle slides by the edges to avoid fingerprints.

PRECAUTION: Gloves should be worn throughout procedure. Patient specimens and all materials coming into contact with them should be handled as if capable of transmitting infections and disposed of with proper precautions.

2. FINGER PRICK PROCEDURE: Capillary blood is preferred to venous blood. Use the tip of the middle or “ring” finger. The skin area to be punctured should be warm so that blood flow will be adequate. Depending on the physical setting and the patient’s condition, warming the hand in warm water, covering the hand with a hot, wet towel, or briskly rubbing the hand may be used to warm the hands prior to the finger stick. Dry skin thoroughly and prior to performing the finger stick use an alcohol wipe to cleanse the finger; rub dry with a piece of gauze. Perform a finger stick using a sterile lancet. Use the gauze to wipe away the first drop of blood. Allow the blood to well up in a large drop. Gentle pressure may be used on the finger if needed.

3. Prepare at least two thin and two thick smears on separate slides. (Combination thick/thin smears are not recommended for diagnostic use although may be used for field screening use or to prepare slides for educational purposes.)

4. LABEL ALL SLIDES WITH THE PATIENT NAME, DATE AND TIME OF COLLECTION.

5. FOR THICK FILMS:
Touch the slide to the drop of blood. Use the corner of another clean slide to spread the drop of blood evenly, with a circular motion, until the drop is about the size of a dime (about 18mm in diameter) and of such a density that fine print can just be read through it. Two drops may be put on one slide.

6. FOR THIN FILMS:
Place one drop (approximately 0.50 ml) of blood near one end of a clean microscope slide. Hold a second slide at a 30° angle and immediately draw into the drop of blood. Allow the blood to spread almost to the width of the slide; rapidly and smoothly push the spreader slide to the opposite end of the slide, pulling the blood behind it.

Note: A properly prepared thin film is thick at one end and thin at the other. The thin, feathered end of the film should be centrally located on the slide with free margins on both sides; the feathered edge should be only one layer thick. Streaks in the blood film indicate dirt on the slides; holes indicate the presence of grease on the slide.

7. FOR COMBINATION THICK/THIN FILMS:
Combination thick/thin smears are not recommended for diagnostic use because of the amount of time that must be allowed for drying the thick smear before the smears can be stained. The combination film may be used for field screening use or to prepare slides for educational purposes.

Make a thin smear first on about 2/3 of the slide and then make a thick smear. Leave a space between the two smears so that the thin smear can be fixed.

8. After the collection of the specimen, pressure should be applied to the puncture site with sterile cotton or gauze until bleeding stops. Apply a bandage strip to the site.

9. DRYING OF BLOOD FILMS: Films should be allowed to dry in a horizontal position at room temperature. Protect smears from dust, insects or other contaminants. Thin smears will dry and be ready to fix and stain in about 15 minutes. Thick smears should dry several hours or overnight. Thick smears must be thoroughly dry to ensure that the smear does not wash off during staining. Combination thick/thin smears should be treated the same as a thick smear.

REAGENTS

Wright (Wright-Giemsa) Stain
Used in hematology, this stain is not optimal for blood parasites. It can be used if rapid results are needed, but should be followed up when possible with a confirmatory Giemsa stain, so that Sch├╝ffner’s dots can be demonstrated.

Giemsa Stain

1. Methanol

2. Giemsa Stain- Azure B (Certified) or Wright-Giemsa Stain

3. Stock Buffers:

A. Alkaline Buffer:
Disodium hydrogen phosphate-anhydrous (Na2HPO4) - 9.5gm
Distilled Water - 1000.0ml
Store at room temperature in a tightly capped container.

B. Acid Buffer
Sodium dihydrogen phosphate-monohydrate (NaH2PO4· H2O) - .9.2gm
Distilled Water - 1000.0ml
Store at room temperature in a tightly capped container.

4. STOCK SOLUTION OF TRITON X-100
10% aqueous solution. Store tightly stoppered at room temperature.

5. WORKING BUFFERS
A. Working Buffer for Thin Smears or combination thick/thin smears
Stock acid buffer . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 39.0ml
Stock alkaline buffer . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .61.0ml
Distilled Water . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 900ml
Add 1 ml of the stock TRITON X-100 10% aqueous dilution per 1000mls
Buffer solution. (Final concentration = 0.01% Triton X-100.)
Adjust pH of Buffer to 6.8 -- 7.0.

B. Working Buffer for Thick Smears
Stock acid buffer . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 39.0ml
Stock alkaline buffer . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .61.0ml
Distilled Water . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 900ml
Add 10 mls of the stock TRITON X-100 10% aqueous dilution per 1000 mls buffer solution. (Final concentration = 0.1% Triton X-100.)
Adjust pH of Buffer to 6.8 -- 7.0.

CALIBRATION

1. pH Meter--Calibration of the pH meter is done before each use (if available).

2. Ocular Micrometer--An ocular micrometer is recommended for measuring parasite size. The ocular micrometer is calibrated with a stage micrometer and the adjustment factors are posted on each microscope.

QUALITY CONTROL

Smears, which are positive for hemo-parasites may not always be available. A blood smear, thick and/or thin, is run once each month or with each staining procedure if done less often than once each month. The blood smear does not have to be positive for blood parasites. Good color differentiation of red and white cells is an indication of a good quality stain.

Results of Q.C. smears for blood parasites are recorded on the QC Record Sheet for Giemsa Staining. This record is maintained in the QC Log Book.

STAINING PROCEDURE

A. Thin Blood Smears
1. Fix smears in absolute methanol. Slides may be briefly dipped in a coplin jar or while holding slide at an angle, methanol can be dropped on the smear. Allow to air dry completely.

2. Prepare the working stain solution. Add 1 ml of stock Giemsa or Wright-Giemsa to 19 mls of Working Buffer for Thin Smears. Place the smear side down in a petri dish or other tray with a low edge. Rest the end of the slide on an applicator stick or the edge of the pan. Flood the stain underneath the slide and stain for 20 minutes. This method minimizes stain precipitate and debris on the stained smear. (Time and dilution can be adjusted as necessary for proper staining reactions.)

3. Wash briefly by gently rinsing or dipping in and out of a jar of working buffer for thin smears.

4. Allow slides to air-dry in a vertical position.

B. Thick Blood Smears
1. Blood films must be thoroughly dry. Dry for several hours or overnight. Do not dry in an incubator or by exposure to heat as this will fix the blood cells and interfere with lysing the red blood cells prior to staining. DO NOT FIX SLIDES IN METHANOL.

2. Place slides in a coplin jar of tap water for 1-2 minutes. This will lyse the red cells on the smear.

3. Prepare the working stain solution. Add 1 ml of stock Giemsa or Wright-Giemsa to 19 mls of Working Buffer for Thick Smears. Place the smear side down in a petri dish or other tray with a low edge. Rest the end of the slide on an applicator stick or the edge of the pan. Flood the stain underneath the slide and stain for 20 minutes. This method minimizes stain precipitate and debris on the stained smear. (Time and dilution can be adjusted as necessary for proper staining reactions.)

4. To rinse the smear, immerse in a coplin jar of working buffer for thick smears for 3 to 5 minutes.

5. Air dry in a vertical position.

C. For Combination Thick/Thin Smears

1. Blood films must be thoroughly dry. Dry for several hours or overnight. Do not dry in an incubator or by exposure to heat as this will fix the blood cells and interfere with lysing the red blood cells prior to staining.

2. Dip the thick portion of the smear in tap water for 1-2 minutes. Do not allow any water to get on the thin smear portion. Air-dry the smear.

3. Hold the slide with the thin portion down and drop methanol onto the smear. Allow alcohol to drain off and air dry. Smear must be completely dry before staining.

4. Prepare the working stain solution. Add 1 ml of stock Giemsa or Wright-Giemsa to 19 mls of Working Buffer for Thin smears. Place the smear side down in a petri dish or other tray with a low edge. Rest the end of the slide on an applicator stick or the edge of the pan. Flood the stain underneath the slide and stain for 20 minutes. This method minimizes stain precipitate and debris on the stained smear. (Time and dilution can be adjusted as necessary for proper staining reactions.)

5. To rinse the smear, immerse in a coplin jar of Working Buffer for Thin Smears for 3 to 5 minutes.

6. Allow slide to air dry in a vertical position with the Thick film down.

MICROSCOPIC READING OF SMEARS FOR HEMO-PARASITES

If microfilariae are suspected, scan both thick and thin smears entirely on the low power objective. Use higher power objectives to identify any parasites found.

Smears for Plasmodium species, Babesia species, Trypanosomes are read with the oil immersion (100X) objective. The entire Thick Smear should be examined; a minimum of 300 fields are read before a thin smear may be reported as negative.

Use reference materials available in the lab to identify any parasites found. If parasites are present, carefully study the morphology to determine:
· Stages found
· Size and shape of infected RBC’s
· Presence of schuffner’s dots
· Appearance of parasite cytoplasm
· Color of pigment (malaria)
· Number of merozoites in schizonts (malaria)
· Indicate the relative number of parasites seen as rare, few, moderate or many
Determine the species is possible.

QUANTIFICATION OF PARASITES

In some cases (especially malaria) quantification of parasites yields clinically useful information. If this information is needed by the physician, malaria parasites can be quantified against blood elements such as RBCs or WBCs.
To quantify malaria parasites against RBCs, count the parasitized RBCs among 500-2,000 RBCs on the thin smear and express the results as % parasitemia.
% parasitemia = (parasitized RBCs/total RBCs) × 100
If the parasitemia is high (e.g., > 10%) examine 500 RBCs; if it is low (e.g., <1%) blood="(parasites/WBCs)">